צביעת גרם
מתוך ויקיפדיה, האנציקלופדיה החופשית
צביעת גרם היא תהליך שנועד להבדלה ראשונית בין סוגי חיידקים.
לרוב יש לצבוע חיידקים על מנת לראותם בבירור מבעד למיקרוסקופ.
במהלך ניסויי צביעה של חידקים, מצא בשנת 1884 הרופא הדני הנס כריסטיאן גרם (Hans Christian Gram) כי צביעה בכחול, אחריה בסגול ושטיפה באלכהול משאירה חלק מהחידקים סגולים (או וורודים). כאשר חקר את הנושא גילה שהנושא נובע מהבדלים במבנה הביוכימי ובעובי של דופן התא.
צביעת גרם מבדילה בין חיידקים גרם-חיוביים (+g) לגרם-שליליים (-g) כלומר בעלי דופן תא עבה או דקה, בהתאמה. התהליך קרוי על שם גְרָם, שהחל את פיתוחו, כדי להבדיל בין החיידקים לתאי הרקמות שלידן הן נמצאו. בפרסום המקורי של השיטה הוא התנצל על כך שהצביעה שפיתח טובה רק לחלק מהחיידקים (שכיום נקראים גרם-חיוביים). השלב הסופי של התהליך, המאפשר לראות גם את החיידקים הגרם-שליליים - הצביעה הנגדית, הוסף מאוחר יותר.
הצביעה מתבצעת באמצעות הכנת תתקין של חיידקים על זכוכית נושאת וייבושו באמצעות העברה על להבה לזמן קצר. בשלב הראשון צובעים את הדגימה בצבע סגול. בשלב השני שוטפים את הדגימה בתמיסת יוד - היוצר תצמיד עם הצבע הסגול. עד לשלב זה נצבעים כל החיידקים. שטיפה באתנול מסלקת את תצמיד הצבע הסגול-יוד מהחיידקים הגרם שליליים אך לא מהגרם חיוביים. צביעה נגדית בצבע ורוד, (למשל ספרנין), צובעת שוב את כל החיידקים. התוצאה הסופית מראה חיידקים גרם-חיוביים בצבע כחול-סגול ואילו חיידקים גרם-שליליים בצבע אדום-ורוד.
צביעת גרם אינה שיטה מדויקת במיוחד. כאמור, זוהי שיטה להבדלה ראשונית; במקרים רבים יש לשלבה עם שיטות אחרות ולהצליב את התוצאות. גורמים רבים עלולים להביא לתוצאות שגויות בצביעת גרם, כגון התיישנות הצבעים, ביצוע לא נכון של הצביעה, גיל החיידקים הנבדקים (חיידקים "זקנים" קולטים פחות את הצבע הסגול, ועלולים להיראות שליליים למרות שהם חיוביים) ועוד.
למרות הוותק הרב של השיטה, משמשת היא עד לימינו כקריטריון ראשון במעלה לאבחון וזיהוי חיידקים במעבדה ולמיון טקסונומי של חיידקים. ההבדל במעטפת תאי החיידקים, בעיקר בדופן, הגורם לחלק מהם לשמור (למרות השטיפה באתנול) על תצמיד הצבע הסגול והיוד (החיידקים הגרם-חיוביים) ובאחרים לאבד אותו עקב השטיפה (חיידקים גרם-שליליים - הללו קולטים את הצבע הנגדי, הוורוד, במקום התצמיד הסגול שנשטף מהם) אינו שרירותי, אלא מעיד על הבדלים משמעותיים בין שתי קבוצות החיידקים.
שיטות נוספות לצביעת חידקים הן:
- צביעת הספורות (בצבע ירוק)
- צביעת קפסולה (בצבע שחור)
- צביעה חומצית בקרבול פוקסין
