フローサイトメトリー
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フローサイトメトリー(Flow cytometry)とは微細な粒子を流体中に分散させ、その流体を細く流して、個々の粒子を光学的に分析する手法のこと。微粒子を選択的に回収することもできる。フローサイトメトリーに用いられる装置をフローサイトメーター(Flow cytometers)と呼ぶ。主に細胞を個々に観察する際に用いられる。
一定波長の光線(通常はレーザー光)を流体に当て、通常は光線に沿った方向の前方散乱(Forward Scatter = FSC)と、光線と直角の方向の側方散乱SSC(Side Scatter)を検出する。また微粒子を蛍光物質で標識し、レーザー光によって生じた蛍光を検出する蛍光検出器が一つかそれ以上備えられている。これらの検出器によって流体中の粒子が影響を及ぼした光、および蛍光を検出する。これらの検出されたピークから粒子の物理・化学的性質を推定することができる。 細胞の場合FSCからは細胞の大きさが、SSCからは細胞内の複雑さ(核の形、細胞内小器官、膜構造などに由来)を分析できる。各検出器の組み合わせ、蛍光物質や免疫染色により非常に多様な分析が可能である。
近年では複数の光線と検出器を装備したものが市販されており(光線4種、検出器14種など)、複数の抗体を用いることでより正確に分析できるようになっている。またセルソーターを標準装備したものも多く、出口の経路を切り換えることで高精度かつ高速で目標粒子を分出できる。4種類の集団に分出でき、理論的には1秒当り90,000個の粒子を処理できる。
[編集] 適用分野
フローサイトメトリーは分子生物学をはじめ病理学、免疫学、海洋生物学などで用いられている。さらに分子生物学的な手法である蛍光で標識した抗体を用いることで標的細胞を特定する方法は、細胞分化の研究だけでなく医学分野でも利用価値が高く移植、腫瘍免疫学、化学療法、遺伝学、再生医学などで用いられている。
[編集] 歴史
1947年、Wallace Coulterにより原理が考案され、1953年に流体による細胞数の計測器を実用化。1965年にMarck Fulwylerによりセルソーターが開発。1969年にはVan Dillaによりアルゴンレーザー搭載したフローサイトメーターが開発された。