Polymorphisme de longueur des fragments de restriction
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Traduit d'après l'article anglais * RFLP
En Biologie moléculaire, le terme polymorphisme de longueur des fragments de restriction (ou RFLP) est utilisé dans deux sens :
- comme une caractéristique des molécules d'ADN permettant de les distinguer les unes des autres,
- comme la technique de laboratoire qui utilise cette caractéristique pour différencier ou comparer des molécules d'ADN. Cette technique est utilisée pour la réalisation d'empreintes génétiques et dans les test de paternité.
[modifier] Méthode
L'ADN d'un individu ou d'une cellule est d'abord extrait et purifié. L'ADN purifié peut être amplifié par PCR. L'ADN est ensuite coupé en fragments de restriction par une enzyme de restriction, cette dernière coupant l'ADN au niveau d'une séquence qui lui est spécifique (site de restriction). Les fragments d'ADN ainsi obtenus, nommés fragments de restriction, sont ensuite séparés selon leur longueur par électrophorèse sur gel d'agarose. Le gel obtenu est ensuite analysé par Southern Blotting et révélé avec une ou plusieurs sondes.
[modifier] Résultat
La distance entre deux sites de coupure de l'enzyme de restriction (site de restriction) varie selon les individus (du fait du polymorphisme des individus) : de ce fait la longueur des fragments de restriction varie. Les positions de certaines bandes d'ADN (sur le gel d'électrophorèse) seront donc différentes d'un individu à l'autre. Le polymorphisme existant entre individus d'une même espèce peut être ainsi visualisé grace au polymorphisme de leur ADN. Cette technique permet de mettre en évidence les "particularités" d'un individu. Elle permet également de montrer les relations génétiques qui peuvent exister entre individus, du fait de la transmission des caractères génétiques de parents à enfant. La technique est également utilisée pour étudier les relations entre différentes espèces.
[modifier] Voir aussi (A compléter)
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