Minipréparation
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Vous avez de En biologie moléculaire, une minipréparation ou miniprep est une technique permettant d'extraire une petite quantité (100 ng à 5 μg) d'ADN sous forme de plasmide provenant de bactéries ayant subi une transformation, le plus souvent effectué sur Escherichia coli.
Une application de cette technique pourrait être de transmettre un plasmide à quelques bactéries d'E. coli et de sélectionner dans un deuxième temps uniquement celles qui ont reçu ce plasmide en utilisant un marqueur génétique comme un gène conférant une résistance à un antibiotique.
L'étape de la miniprep consiste à lyser les cellules et à libérer le plasmide d'ADN qui sera ensuite solidifié (précipité) grâce à l'éthanol et laver avec de l'éthanol 70% pour dissoudre les sels.
L'ADN est précipité par un volume double d'éthanol ou un volume égal d'Isopropanol après l'ajout de cations qui neutralisent les charges négatives de la molécule.
L'excès de sel est ensuite lavé par l'éthanol à 70%, afin de rendre ses propriétés physico-chimiques à l'ADN.
