Plattendiffusionstest
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Der Plattendiffusionstest, ein Agardiffusionstest, der auch als Diffusionstest oder Diffusionsplattentest bezeichnet wird, stellt ein mikrobielles Testverfahren dar.
Bei diesem Verfahren werden feste Nährmedien in Form von Agarplatten verwendet, die bereits einen Mikroorganismus als Testorganismus in fein suspendierter Form enthalten. Die Anwesenheit des Testorganismus ist bei Versuchsbeginn nicht sichtbar; erst nach erfolgter Bebrütung der Agarplatte lässt sich das Wachstum des Testorganismus in der Platte durch mit bloßem Auge feststellbare Trübung des Agars erkennen. Zonen, in denen kein Wachstum stattfand, bleiben klar. Die Beobachtung und Messung der Wachstumszonen lässt sich zur qualitativen und quantitativen Bestimmung von wachstumsfördernden Substanzen (Vitamine, Aminosäuren) einerseits und wachstumshemmenden Substanzen (Antibiotika, Toxine) einsetzen.
Zur Applikation der Testlösungen auf die vorbereitete Agarplatte gibt es verschiedene Möglichkeiten: Sie werden entweder in mit einem Korkbohrer ausgestanzte Löcher eingefüllt (Lochtest), als auf Filterpapierscheibchen eingetrocknete Lösung auf die Platte gelegt (Scheibchentest) oder in kleine Metallzylinder auf der Oberfläche pipettiert (Zylindertest).
Nach der Bebrütung zeigt sich entweder bei wachstumshemmenden Substanzen ein ringförmiger Hemmhof (siehe Hemmhoftest) bei trübem Bewuchs der restlichen Agarplatte oder bei wachstumsfördernden Substanzen eine Zone ringförmigen Wachstums um den Applikationsort bei klarem Hintergrund der Platte. Durch Messung des Durchmessers der Hemm- bzw. Wachstumszone im Vergleich mit Lösungen bekannter Wirkstoffkonzentration lässt sich die entsprechende Konzentration der zu untersuchenden Testlösungen anhand einer Eichgerade bestimmen.
Der Plattendiffusionstest findet Anwendung bei:
- der Suche nach dem neuen Antibiotika (Wirkungsspektrum, Effektivität)
- der Erstellung von Antibiogrammen zur Ermittlung von Antibiotikaresistenzen
- der Suche nach neuen Produktionsstämmen von Vitaminen und Aminosäuren in der Biotechnologie
Zur genauen Standardisierung und Reproduzierbarkeit des extrem vielseitig anwendbaren Verfahrens sind umfangreiche Kontrollen und ein sehr exakte Vorgehensweise notwendig.
[Bearbeiten] Literatur
- William S. Hewitt, Stephen Vincent: Theory and Application of Microbiological Assay, Academic Press, San Diego, 1989, ISBN 0-12-346445-5
